<<
>>

  ОПРЕДЕЛЕНИЕ РЕЗЕРВНОЙ ЩЕЛОЧНОСТИ КРОВИ ДИФФУЗНЫМ МЕТОДОМ ПО И. П. КОНДРАХИНУ  

  Принцип метода. В одной половине колбы плазму крови обрабатывают серной кислотой, в результате чего выделяется углекислый газ, входящий в состав бикарбонатов. Выделившийся углекислый газ поглощается раствором натрия гидроксида, который находится в другой половине колбы.
Избыток натрия гидроксида, не вошедший в реакцию с углекислым газом, и половину натрия гидрокарбоната (Ка2СОз), образовавшегося в процессе поглощения С02, оттитровывают раствором серной кислоты. По количеству первоначально связанного натрия гидроксида определяют количество выделенного из плазмы углекислого газа, которое эквивалентно содержанию бикарбонатов.

Реактивы: 0,1 н. (0,05 моль/л) раствор серной кислоты (готовят из фиксанала);

0,02 н. (0,01 моль/л) (точно) раствор серной кислоты (готовят из 0,1 н. раствора серной кислоты); 0,1 н. (0,1 моль/л) раствор натрия гидроксида;

0,02 н. (0,02 моль/л) раствор натрия гидроксида (готовят из 0,1 н. раствора натрия гидроксида). Титр этого раствора проверяют перед анализом и доводят до нужной величины;

Рис. 1 			Прибор для определения резервной щелочности крови

Рис. 1

Прибор для определения резервной щелочности крови

 

5 %-ный раствор серной кислоты;

1 %-ный спиртовой раствор фенолфталеина.

Оборудование: сдвоенные колбы с резиновыми пробками (рис. 1). Они должны быть хорошо вымыты без следов щелочи и кислоты; микробюретки на 2 и 5 мл; центрифужные пробирки.

Ход определения. В чистые сухие центрифужные пробирки вносят 0,5—1,0 мл вазелинового масла, 1—2 капли 1%-ного раствора гепарина.

Кровь берут из яремной вены в подготовленную пробирку под слой вазелинового

масла, закрывают пробкой, осто-

рожно перемешивают. В лаборатории центрифугируют ее при

холодильнике при температуре 4 °С. Анализ проводят в течение 8—12 ч после взятия образца крови.

По количеству проб крови с учетом параллельных исследований подбирают сдвоенные колбы и три сдвоенные колбы оставляют для контроля. Точность результатов всей серии исследований полностью зависит от точности титрования раствора натрия гидроксида в контрольных колбах. Все колбы закрывают резиновыми пробками.

Анализы проводят серийно. В одну из каждой пары сдвоенных колб, поочередно открывая, вносят с помощью пипетки и шприца или резиновой груши по 2 мл 0,02 н. раствора натрия гидроксида и плотно закрывают пробкой. В смежную колбу, кроме контрольных, опять поочередно открывая и закрывая, вносят 0,5 мл плазмы крови, находящейся под вазелиновым маслом. После этого в колбы с плазмой (контрольные без плазмы), также поочередно открывая, вносят из пипетки (не выдувая) по 1 мл 5%-ного раствора серной кислоты и быстро плотно закрывают пробкой. Проверяют, хорошо ли закрыты колбы, осторожно вращательными движениями перемешивают плазму крови с кислотой и оставляют стоять в течение 4 ч. Перемешивают плазму с кислотой не менее 3 раз.

Через 4 ч приступают к титрованию. Для этого поочередно открывают колбу, где находится раствор натрия гидроксида, вносят туда 1—2 капли раствора фенолфталеина и титруют из микробюретки на 2 мл 0,02 н. раствором серной кислоты до полного обес

цвечивания раствора. Опытные и контрольные пробы титруют с одинаковой скоростью.

Расчет. По разнице результатов титрования в контрольных и опытных образцах определяют количество мл 0,02 н. раствора натрия гидроксида, связанного с углекислым газом, вытесненным из бикарбонатов плазмы.

Расчет ведут по формуле

(V _ V 1 0 448 х I кп gt; V ° = Ю0, или (Ук - Уп) ¦ 89,6,

где х — количество ССgt;2, об.%; Ук — количество 0,02 н.

раствора серной кислоты, пошедшего на титрование контроля, мл; Уп — количество 0,02 н. раствора серной кислоты, пошедшего на титрование исследуемого образца, мл; Упл — количество плазмы крови, мл (в методике принято равным 0,5 мл); 0,448 — коэффициент пересчета 0,02 н. раствора натрия гидроксида на СО2 в условиях данной реакции; 100 — коэффициент для пересчета результатов анализа на 100 мл плазмы крови.

В конечном счете разницу количества (мл) 0,02 н. раствора серной кислоты, пошедшего на титрование контрольного и опытного образцов, умножают на коэффициент 89,6 и получают конечный результат в об.% СО2. Ошибка метода составляет ±3 %.

Источники: 29, 34.

Нормативы величины резервной щелочности плазмы крови животных представлены в приложениях 5 и 6.

Снижение резервной щелочности крови свидетельствует о сдвиге кислотно-щелочного равновесия в сторону ацидоза, повышение — в сторону алкалоза.

Метаболический ацидоз отмечают при однотипном высоко- концентратном или силосо-жомовом кормлении, кетозе, вторичной остеодистрофии, ацидозе рубца, сахарном диабете, расстройствах желудочно-кишечного тракта, особенно при диарее молодняка, сердечной недостаточности, миоглобинурии, гипоксии, нефрите, почечной недостаточности, септических процессах и т. д. Респираторный ацидоз бывает вследствие замедления процесса отдачи углекислоты легкими. Такое явление наблюдается при расстройстве сердечной деятельности, отеке легких, тяжелой пневмонии, угнетении дыхательного центра, нахождении животных в среде с высокой концентрацией углекислоты в воздухе.

Состояние метаболического алкалоза у животных бывает при алкалозе рубца, введении в организм больших доз пищевой соды. Респираторный алкалоз наблюдается при усиленной гипервентиляции легких, вследствие выведения из организма большого количества углекислого газа, а также при содержании животных на большой высоте.

  1.  
<< | >>
Источник:   И. П. Кондрахин.   Методы ветеринарной клинической лабораторной диагностики: Справочник — М.: Колос,. — 520 с.. 2004

Еще по теме   ОПРЕДЕЛЕНИЕ РЕЗЕРВНОЙ ЩЕЛОЧНОСТИ КРОВИ ДИФФУЗНЫМ МЕТОДОМ ПО И. П. КОНДРАХИНУ  :

  1.   Определение активности щелочной фосфатазы в сыворотке крови по гидролизу р-глицерофосфата (метод Бодански).  
  2.   Определение активности а-амилазы в сыворотке крови, моче, дуоденальном содержимом амилоклассическим методом со стойким крахмальным субстратом (метод Каравея).  
  3.   Метод неферментативного определения лактата и пирувата в одной пробе крови.  
  4.    Флуориметрический метод определения общего тиамина в крови и печени (по Г. Д. Елисеевой).  
  5.   Определение марганца в крови перйодатным методом.  
  6.   Определение общего белка в сыворотке крови рефрактометрическим методом.  
  7.   Определение кетоноиых тел в крови йодометрическим методом.  
  8.   Определение белковых фракций в сыворотке крови турбидимет- рическим (нефелометрическим) методом.  
  9.   Определение свободного аминного азота в сыворотке крови по методу Г. А. Узбекова в модификации 3. С. Чулковой.  
  10.   Определение токоферолов в тканях и сыворотке крови методом колоночной хроматографии. 
  11.   Определение билирубина в сыворотке крови животных по методу Ендрассика—Клеггорна—Грофа в модификации В. И. Левченко и В. В. Влизло. 
  12.   Определение билирубина в сыворотке крови по диазореакции (метод Ендрассика—Клеггорна—Грофа).