<<
>>

  Определение свинца в органах и тканях животных посредством ААС (по В. В. Устенко, 1980). Метод утвержден отделением ветеринарии ВАСХНИЛ, 1980.  

  Принцип. Метод основан на минерализации пробы концентрированными азотной и хлорной кислотами, экстракционном концентрировании свинца дитизоном в хлороформе, последующей реэкстракции его в разбавленную кислоту хлористоводородную и определении содержания элемента методом ААС с электротермической атомизацией.

Реактивы: азотная кислота (о.

с. ч.); хлорная кислота (ч. д. а.); кислота хлористоводородная (о. с. ч.); свинец металлический (х. ч.); лимонная кислота (о. с. ч.); гидроксиламингидрохлорид (о. с. ч.); аммиак водный (о. с. ч.); хлороформ (х. ч.); дитизон (ч. д. а.); бумага индикаторная.

Оборудование: весы аналитические лабораторные; плитка электрическая; баня водяная; спектрофотометр атомно-абсорбционный «Перкин-Элмер-603» с электротермическим атомизатором или любой другой подобный прибор, в том числе отечественного производства; колбы мерные на 25—100 мл; воронки делительные на 50—200 мл; пипетки на 1—10 мл; микропипетки типа ПЛО 1-20.

Очистка дитизона. Растворяют 1 г дитизона в делительной воронке в 100 мл хлороформа. Добавляют 50 мл аммиака (3%-ного по объему) и встряхивают воронку в течение 3 мин. Дитизон переходит в водный слой. После разделения жидкостей нижний органический слой отбрасывают. К аммиачному экстракту, содержащему дитизон, постепенно добавляют разбавленную (1:1) кислоту хлористоводородную, пока дитизон не выпадет в виде темных хлопьев. Далее извлекают дитизон в 100 мл хлороформа при встряхивании воронки в течение 3 мин. Хлороформный слой отделяют и переносят в чашку для выпаривания. Хлороформ выпаривают на водяной бане путем медленного нагревания при 50 °С.

Для приготовления 0,5%-ного раствора дитизона 0,5 г препарата переносят в мерную колбу на 100 мл и доводят объем до метки хлороформом. Раствор хранят в темноте при 5—7 °С.

Все водные растворы готовят на бидистиллированной воде.

Для приготовления 20%-ного раствора лимонной кислоты 20 г реактива растворяют в мерной колбе на 100 мл и доводят объем до метки.

Для получения 5%-ного раствора гидроксиламингидрохло- рида 5 г реактива растворяют в мерной колбе на 100 мл в воде и доводят объем до метки. Готовят 1,0 и 0,1 н. растворы кислоты хлористоводородной путем разбавления соответственно 83 мл и 8,3 мл концентрированной 37%-ной кислоты в 1 л воды.

Основной раствор свинца концентрацией 1000 мг/л готовят путем растворения 1 г металлического свинца в 10 мл разбавленной (1:1) азотной кислоты при нагревании, после чего объем доводят до 1 л 0,1 н. кислотой хлористоводородной.

Стандартный раствор свинца концентрацией 0,1 мг/л готовят непосредственно перед проведением анализа. Для этого 1 мл основного раствора вносят в мерную колбу на 100 мл и доводят объем до метки разбавленной (1:100) азотной кислотой. В мерную колбу на 100 мл вносят 1 мл приготовленного раствора концентрацией 10 мг/л и доводят объем до метки азотной кислотой той же концентрации. Для построения градуировочного графика готовят растворы с известным содержанием свинца. В стаканы вносят различные количества стандартного раствора концентрацией 0,1 мг/л и разбавленной азотной кислоты (табл. 60).

60. Приготовление растворов для градуировочного графика

Компоненты градуировочных раство

№ градуировочных растворов

ров и их объем

1

2

3

4

5

6

Стандартный раствор (ОД мг/л), мл

0,25

0,5

2,5

5,0

10

Кислота азотная (1:100), мл

10

9,75

9,5

7,5

5,0

Содержание свинца в пробе, мг/л (мг/кг)

0

0,005

0,01

0,05

0,1

0,2

Ход определения. В химический стакан помещают 5 г исследуемого материала, добавляют 15 мл концентрированной азотной кислоты и выдерживают 30 мин при комнатной температуре.

Затем медленно нагревают на электроплитке до образования пены и кипятят до тех пор, пока не снизится выделение бурых паров окислов азота. Стакан снимают с плитки и охлаждают. Приливают по 15 мл концентрированных азотной и хлорной кислот и кипятят до образования белых паров хлорной кислоты. Остаток этой кислоты выпаривают. Минеральный остаток растворяют в 5 мл 1 н. кислоты хлористоводородной и количественно переносят в мерную колбу на 25 мл, доводя объем в колбе до метки бидистиллированной водой. Из мерной колбы пробу переносят в делительную воронку на 100 мл, добавляют 2 мл 20%-ного раствора лимонной кислоты, 2 мл 5%-ного раствора гидроксиламингидрохлорида и доводят pH до 8—9 концентрированным раствором аммиака, контролируя величину его по индикаторной бумаге. Затем приливают
  1. мл 0,5%-ного раствора дитизона в хлороформе и экстрагируют свинец при интенсивном встряхивании делительной воронки в течение 2 мин. После разделения фаз органическую фазу переносят в другую делительную воронку на 50 мл, а из водной экстракцию повторяют следующими 5 мл раствора дитизона. Экстракты объединяют в делительной воронке на 50 мл, прибавляют 5 мл 0,1 н. кислоты хлористоводородной и реэкстрагируют свинец встряхиванием в течение 2 мин. Органический слой отделяют, а водный слой промывают двумя порциями хлороформа по 0,5 мл.

ААС проводят при следующих условиях: резонансная длина волны 283,3 нм, ток лампы с полым катодом 10 мА, спектральная полоса пропускания монохроматора 0,7 нм. Режим работы электротермического атомизатора: высушивание — 100 °С (30 с), озо- ление — 500 °С (30 с), атомизация — 2100 °С (5 с). Расход аргона на стадии атомизации 25 мл/мин. Объем вводимой в атомизатор пробы 20 мкл.

Расчет. Содержание свинца в исследуемом материале вычисляют по

  формул

 

 

  формул


где х — содержание свинца, мг/кг; С — концентрация свинца в анализируемом растворе, мг/л; 5 — коэффициент; Р — масса навески пробы, г.

Клиническое значение. Обнаружение в почках и печени подозреваемых в отравлении животных свинца в количестве 10 мг/кг и выше дает основание для постановки предварительного диагноза на свинцовую интоксикацию. Окончательный диагноз может быть поставлен по результатам анализа анамнестических данных (использование для окраски животноводческих помещений свинцовых белил, попадание в места выпаса животных пластин списанных свинцовых аккумуляторов и др.), клинических признаков интоксикации (судороги, скрежет зубами, слюнотечение, затрудненное дыхание, потеря зрения), характера патологоанатомических изменений (гастроэнтерит с некрозом отдельных участков слизистой оболочки, дистрофические изменения в печени и почках).

Источник литературы

  1. Башмурин А. Ф. Руководство по токсикологическому анализу в ветеринарии. — М.: Колос, 1968.
  2. Временные методические указания по определению синтетических пиретрои- дов (амбуш, децис, рипкорд, сумицидин) методами газожидкостной и тонкослойной хроматографии в растениях, почве, воде водоемов. — М.: Минздрав СССР, 1981.
  3. Временная методика определения Т-2-токсина в кормах с применением имму- ноферментного анализа. — М.: Департамент ветеринарии Минсельхозпрода России, 1996.
  4. Ермаков В. В., Кроль М. Ю., Устенко В. В. Методы определения тяжелых металлов: ртути, кадмия, свинца, меди / В кн.: Справочник—санитария кормов. — М.: Агропромиздат, 1991.
  5. Клисенко М. А. Методы определения микроколичеств пестицидов в продуктах питания, кормах, внешней среде. — М.: Колос, 1983.
  6. Методы определения нитратов и нитритов. — М.: Отделение ветеринарии ВАСХНИЛ, 1986.
  7. Методика определения дезоксиниваленола в зерне с применением обращен- но-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии. — М.: Отделение ветеринарной медицины РАСХН, 1995.
  8. Методические указания по санитарно-микологической оценке и улучшению качества кормов. — М.: ГУВ Госагропрома СССР, 1986.
  9. Николаев А. В. Теория и практика химико-токсикологического анализа в ветеринарии. — М.: Колос, 1968.
  10. Серов В. М., Волкова В. А. Методы определения алкалоидов / В кн.: Справочник — санитария кормов. — М.: Агропромиздат, 1991.
  11. Таланов Г. А., Хмелевский Б. Н. Справочник—санитария кормов. — М.: Агропромиздат, 1991.

 

<< | >>
Источник:   И. П. Кондрахин.   Методы ветеринарной клинической лабораторной диагностики: Справочник — М.: Колос,. — 520 с.. 2004

Еще по теме   Определение свинца в органах и тканях животных посредством ААС (по В. В. Устенко, 1980). Метод утвержден отделением ветеринарии ВАСХНИЛ, 1980.  :

  1. Глава 6 МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АНТИГЕЛЬМИНТИКОВ В ОРГАНАХ И ТКАНЯХ ЖИВОТНЫХ
  2. Фармакокинетика фенбендазола в организме животных разных видов (В. Вшуе1, 1980)
  3. Б. П. М АНТЕИФЕЛ Ь. Экология поведения животных. М.: Наука, 1980г. 220 с., 1980
  4.   МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТЯЖЕЛЫХ МЕТАЛЛОВ: РТУТИ, КАДМИЯ, СВИНЦА, МЕДИ  
  5. Длинноногий потору Potorous longipes Seebeck et Johnston, 1980 (IV, 36)
  6.   Определение токоферолов в тканях и сыворотке крови методом колоночной хроматографии. 
  7. 2.2.1.1. Сравнительная оценка методов выявления грибов рода Malassezia на покровных тканях животных
  8. ГЛАВА СЕМНАДЦАТАЯ Подтверждение движения и циркуляции крови посредством- наблюдений над сердцем и посредством анатомических исследований
  9.   Определение витамина в биологических жидкостях и тканях.  
  10.   Определение билирубина в сыворотке крови животных по методу Ендрассика—Клеггорна—Грофа в модификации В. И. Левченко и В. В. Влизло. 
  11.   Определение активности а-амилазы в сыворотке крови, моче, дуоденальном содержимом амилоклассическим методом со стойким крахмальным субстратом (метод Каравея).  
  12.   МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ МИКОТОКСИНОВ  
  13. Разработка метода, определения остаточных количеств препаратов. 
  14. Определение мяса и мясных продуктов по сравнительной анатомии внутренних органов.
  15.   МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ВИТАМИНОВ