<<
>>

ДИАГНОСТИКА

Диагноз на АБН ставят комплексно с учетом эпизоотических, вирусологических, клинических и патоморфологических данных. Однако, отсутствие методов дезагрегации иммунных комплексов, равно как и неудачные попытки культивирования вируса в пробирочной системе, долго сдерживало разработку специфических методов диагностики болезни.
Для лабораторной диагностики АБН Маллен предложил неспецифический метод йодно- агглютинационный тест (реакция йодной агглютинации, йодная проба, йодный тест, сокращенно ЙАТ). Он основан на свойстве р-ра йода осаждать гаммаглобулины при повышении их концентрации в сыворотке крови. Метод прост в постановке, но недостаточно чувствителен - выявляет лишь 40 - 60% инфицированных норок. У взрослых норок положительная реакция проявляется через 21-56 дн после заражения, а у молодняка - в 2-3-мес возрасте.

Ранние стадии болезни (через 3-5 нед после заражения) с помощью ЙАТ выявить не удается. Тяжелобольные норки при сильном поражении почек также не всегда реагируют по этому тесту вследствие снижения уровня гаммаглобулина. Положительный результат реакции в большинстве случаев совпадает с патологоанатомическим диагнозом на АБН (51-96%) или с патоморфологическим диагнозом (92-95%). Показания ЙАТ хорошо коррелируют с гипергаммаглобулинемией, считающейся постоянным признаком при АБН. Тесная зависимость между положительным ЙАТ и клиникоэпизоотологическим и другими проявлениями АБН свидетельствуют о несомненной диагностической ценности ЙАТ как метода, предназначенного для массовых исследований в производственных условиях. Важным подтверждением диагностической ценности ЙАТ служат примеры успешной борьбы с АБН, когда мероприятия основывались на показаниях этой реакции. Таким образом, несмотря на не специфичность и недостаточную чувствительность, ЙАТ является одним из наиболее признанных массовых тестов, однако применение его для установления диагноза у отдельно взятого животного не аргументировано.

Методом ИФ в 1969 г. было доказано, что АГ вируса АБН присутствует в цитоплазме макрофагов печени, селезенки и лимфоузлов в высокой концентрации в течение первых 10 дн после заражения и что у норок вырабатываются АТ, реагирующие с этим АГ. Затем вирус, экстрагированный из инфицированных тканей норок, был использован для приготовления АГ и успешно применен в РСК, встречном электрофорезе, РДП. Методом хроматографии и опытами in vivo установлено, что АГ и иммунный преципитат, сформированный во встречном электрофорезе, оказались инфекционными. Следовательно, АГ вируса АБН, содержавшийся в линиях преципитации, был ничем иным, как вирусом. Дальнейшие исследования иммунного преципитата с помощью ЭМ подтвердили, что АГ представлен вирусными частицами. Таким образом, была показана возможность как специфической, так и неспецифической диагностики заболевания. До недавнего времени считалось, что вирус АБН не нейтрализуется специфическими АТ естественного хозяина in vitro и in vivo. Однако, после обработки вируса Н-бутанолом при фильтрации через мелкопористые мембраны (диаметр пор 0,005 мкм) основная масса его (>95%), быстро нейтрализовался АТ при 37°С, хотя резистентная фракция вируса сохраняла инфекционность. С помощью монАТ эпитопы нейтрализации вируса обнаружены на вирионных белках 75 и 85 кД (29).

Предложен второй тест неспецифической лабораторной диагностики АБН - тимоловая проба. Она основана на том, что при поражении печени изменяются белки и их соотношение, вследствие чего нарушается физико-химическое состояние коллоидных р-ров. В тимоловом буфере они выпадают в осадок и вызывают его помутнение. Результаты теста выражают в ед. экстинции, умноженных на 100. У здоровых норок величины тимоловой пробы колеблются от 0 до 4 ед.; показатели в пределах 4,1 -7 считаются сомнительными (звери подлежат вторичной проверке); величины выше 7 ед. свидетельствуют о заболевании. Для диагностики болезни используется также глютаровый альдегид - глютаральдегидный тест (ГАТ). Сущность метода заключается в том, что глютаральдегид взаимодействует с аминогруппами lg и вследствие полимерализацин образует ввдимый невооруженным глазом гель.

Этот тест еще не нашел широкого практического применения. В прижизненной диагностике имеет значение обнаружение в моче низкомолекулярных белков Бене-Джонса. Одним из неспецифических методов служит также простая радиальная иммунодиффузия у-глобулина в агаровом геле. Для постановки реакции требуется гомогенный норковый сывороточный IgG, кроличья антисыворотка против него и кровь норок. Принцип реакции заключается в диффузии испытуемого материала в агаровой пластинке, содержащей АТ к тому или иному белковому компоненту. Надежность теста можно повысить проведением повторного исследования через определенное время. Наиболее достоверным тестом в диагностике АБН являются патоморфологические исследования. Патогномоничными признаками служат системная, генерализованная гиперплазия с тенденцией к образованию зрелых плазматических клеток, расширение и пролиферация желчных протоков и периартериит. В этом случае наряду с секцией можно исследовать мазки-отпечатки из лимфоузлов для обнаружения в них плаз- моцитарной реакции.

Специфические методы диагностики. При АБН это НИФ. Метод вполне применим в лабораторных условиях. Иммуноферментный метод - дотИФА иа нитроцеллюлозе оказался в 1000 раз чувствительнее, чем встречный иммуноэлекгрофорез. Он выявлял на 19% больше положительных результатов и требует меньше времени и затрат. Основан метод на использовании монАТ и штамма Uthal (24).

Полимеразная цепная реакция оказалась пригодной как метод индикации вируса АБН на ранних этапах инфекции (20). Метод ИЭОФ, предложенный Cho и Ingrem в 1972-1973 гг. для прижизненной диагностики АБН, основан на том, что в поле электрического тока АГ перемещается к положительному полюсу, а АТ - к отрицательному, образуя в месте соприкосновения полосу преципитации. В качестве АГ используют фреоновые экстракты печени, селезенки и лимфоузлов экспериментально зараженных норок. ИЭОФ отличается высокой специфичностью и позволяет выявить больных норок через 1 нед после заражения.

ИММУНИТЕТ И СПЕЦИФИЧЕСКАЯ ПРОФИЛАКТИКА

Все заболевшие норки гибнут, поэтому вопрос о естественном иммунитете отпадает (3). В США испытывали инактивированную вакцину (10%-ный гомогенат селезенки и печени экспериментально зараженных норок, подвергнутый термоинакгивации и смешанной с адъювантом Фрейнда в равных объемах). Вакцина оказалась не иммуногенной, повышала восприимчивость норок к последующему заражению и усиливала степень поражения органов. В 1964 г. Рассел и Максфельд запатентовали инактивированную формолвакцину. Её вводят подкожно, внутрибрюшинно, внутримышечно или внутрикожно по 1-2 мл. Вакцина создает непрочный иммунитет, но позволяет повысить резистентность животных и прервать распространение инфекции. Китайские ученые впервые установили существование долговременной отрицательной реакции на антиген АБ у большого числа норок, что, вероятно, может быть основой иммунизации и предотвращения болезни (21).

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 1.

Болотников И.А. и др. Ветеринария, 1982, 12 :70. 2.Голикова Е.М. и др. Сб .н. тр. ЛВИ, 1979,

56 :28. З.Слугин B.C. Алеутская болезнь норок. М., 1975. 4,Слугин B.C. Сб. н. тр. НИИПЗК. 1980, 21 :14. 5.Слугин B.C. Автореф. дисс., М., MBA 1982. б.Слугин B.C. и др. Ветеринария, 1986, 3 :31. 7.Сюрин В.Н. и др. Частн. вет. вирусология, Колос, 1979. 8.

AastedB. et.al. J Virol, 1984, 51, 1 :7. 9.Aasted В. etal. J Clin Microbiol., 1983, 18, 3 :637.

lO.Alexandersen S. Actapathol microbiol immunol, Scand.,1985, 1393, 3 :195. 11.An S.H. et.al. Scientific, 1980, 4, 1 :39. 12.Bokhaut B.A. Pelsdirenfokke, 1985, 35, 8 :239. 13.Bloom M. et.al. J Virol., 1982, 43, 2 :608. 14.Cho H.J. et.al. Can J Comp Med, 1979, 37, 3 .217. 15.Dawen Sabine van Kaaden O.R. Zbl Bakteriol 1982, Abt IA, 253, 1 :25. 16.Haas L. et.al. J Vet Med Ser B, 1990, 37, 2 :106. 17.Hahn E.S. et.al. Inf Immunol, 1980, 29, 2 :452. 18.Hahn E.S. Vet Immunol Immunopathol., 1984, 5, 4 :313. 19.Kaaden O.R. etal. Zbl Bakteriol, Microbiol, Hyg, 1984,

A57, 1 :140. 20.Jacksan M. et.al. Norw J Agr Sci, 1992, 9 :383. 21.Ji Ynlin Acta Vet et zootech Sin,1995, 26, 1 :42. 22.Lengyel A. etal. MTA Orv tud aszt kozl, 1979-1980, 30, 3 :419. 23.Mori Shiro etal. J Virol, 1991, 65, 2, :952. 24.Miroshnichenko S.M. et.al. Norv J Agr Sci, 1992,

9 :388. 25.Muller-Peddinghons R. et.al. Zbl Veterinarmed, 1980, 27, 1 :1. 26.Neubert A. Tadunsber Akad Landvirtschaftswiss, 1984, 228 :83. 27.Porter D.D. etal. J Exp Med,1969, 130, 3 :575. 28.Roth S. et.al. Zbl Bakteriol, Microbiol, Hyg, 1984, A258, 4 :528. 29.Stolze B. et.al. Virology, 1987, 158 :174. 30.TrugenU. etal. J Vet Med B, 1993, 40, 1 :66. 31.Wright P. et.al. 2- nd Int Sci Cong Anim Prod Denmark, 1980, Helleroed, S. a. 31/1-38/8. 32. Wright P.F. Am J Vet Res, 1982, 43,5:865

<< | >>
Источник: Сюрин В.Н., Самуйленко А.Я., Соловьёв Б.В., Фомина Н.В.. Вирусные болезни животных. - Москва, ВНИТИБП, 928 с, ил.. 2001

Еще по теме ДИАГНОСТИКА:

  1. ДИАГНОСТИКА
  2. ДИАГНОСТИКА
  3. ДИАГНОСТИКА БЕРЕМЕННОСТИ И БЕСПЛОДИЯ
  4. ДИАГНОСТИКА БЕРЕМЕННОСТИ И БЕСПЛОДИЯ
  5. ДИАГНОСТИКА
  6. ДИАГНОСТИКА
  7. ДИАГНОСТИКА
  8. ДИАГНОСТИКА
  9. ДИАГНОСТИКА
  10. ДИАГНОСТИКА
  11. Патогистологическая диагностика.
  12. ГЕЛЬМИНТОЛАРВОСКОПИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ
  13. ДИАГНОСТИКА
  14. ДИАГНОСТИКА
  15. ДИАГНОСТИКА
  16. ДИАГНОСТИКА
  17. 6.4.4. Пренатальная диагностика наследственных заболеваний
  18. ЗНАЧЕНИЕ НОВЫХ МЕТОДОВ ДИАГНОСТИКИ ВИРУСНЫХ БОЛЕЗНЕЙ
  19. ОСНОВНЫЕ ПРИНЦИПЫ БИОЛОГИЧЕСКОЙИНДИКАЦИИ И ДИАГНОСТИКИ почв