<<
>>

ХАРАКТЕРИСТИКА ВОЗБУДИТЕЛЯ

Четании и Савонуции (1901) впервые доказали вирусную природу КЧП. В 1956 г. Шеффер и Уотерсон впервые установили принадлежность вируса КЧП к гриппу типа А - Myxovirus influenza А. В дальнейшем сообщалось о выделении вирусов гриппа от кур, цыплят, уток, индеек, перепелов, крачек, воробьёв и других птиц. В 1967 г. в СССР был выделен атипичный вариант вируса гриппа А (шт. 314), в 1968 г. - другой высоковирулентный шт. С, в АГ -отношении родственный вирусу КЧП.

Морфология и химический состав. ГА - один из самых крупных белков в вирионе, на его долю приходится 25-35% белков.

Он ответствен за прикрепление вирусной частицы к клетке хозяина и вовлекается в начальные стадии инфекции. Именно против Г А направлены АТ, нейтрализующие инфекционность вируса гриппа. Ввиду столь важной роли ГА в развитии инфекции, структура этого белка привлекла внимание многих исследователей, и к настоящему времени в структурном отношении он наиболее изучен (23). Часть сахаров ГА ВГП может изменяться в различных хозяйских клетках даже в течение одного пассажа (17).

Второй поверхностный АГ вируса гриппа - нейрамииидаза. Этот фермент в составе вируса гриппа известен с 1942 г., одиако функциональная роль его в репродукции вируса до сих пор в полной мере не выяснена. Предполагается, что главная функция нейраминидазы - предотвращение агрегации вирусных частиц иа поверхности клеток. Также известно, что иейраминидаза играет большую роль в иммунологии и патогенезе заболевания.

Устойчивость. При температуре 55°С ВГП инактивируется за 1 ч, при 60°С - за 10 мин, при 65-70°С - за 2-5 мии. При низких температурах и в лиофилизированном состоянии (при -30°С в запаянных ампулах в тёмном месте) сохраняется до 2 лет. В присутствии MgCl2 вирус инактивируется быстрее, а MgS04 стабилизирует его. ГА и инфекционность вируса обычно сохраняются при - 60 °С несколько лет, а при 4°С - несколько недель. Г А свойства более стабильны, чем инфекционные. Инфекционность и ГА-активность вируса можно сохранить, если в осадок добавить простой белок (протамин), квасцы или фосфат кальция или же обработать 35%-ным метанолом при -5°С. Инфекционность вируса пропадает при обработке его формальдегидом, детергентами, оксидированными агентами (йодин), слабыми кислотами, додецилсульфатом, гидроксиламином, ионами аммония. Степень термоинактивации оказалась различной для штаммов, выделенных в одной и той же географической зоне.

Антигенная вариабельность и родство. В настоящее время вирусы гриппа А птиц на основании их поверхностных АГ - ГА (Н) и нейраминидазы (N) - разделены на 13 по Н-АГ и 9 вариантов по N-AГ (табл.VIII.2.) Штаммоспецифические АГ-связи определяются с помощью: РТГА - для определения сходства по ГА; РТНА - для определения сходства или различия по НА; теста двойной диффузии - для определения сходства ГА и НА. У штаммов вируса гриппа А птиц, имеющих АГ характеристику H1N1, выявлено не менее 4 АГ детерминант нейраминидазы. Четкие различия выявлены также у НА штаммов вируса гриппа А птиц с АГ формулой H3N8, следовательно, НА штаммов вируса гриппа А птиц с АГ характеристиками H1N1 и H3N8 имеет на своей поверхности не менее 4-х АГ различных детерминант: 1 общую для вирусов, имеющих одинаковый сероподтип, 2 - перекрестно реагирующих и 1 - штаммоспецифическую (7).

Таблица VIII.2. Обозначения серотипов вируса гриппа А птиц Серовариант Наименование штамма Формула 1. А/утка/ Альберта/35/76/ H1N1 2.

А/утка/Г ермания/1215/73 H2N3 3. А/утка/У краина 1/63 H3N8 4. А/утка/ЧССР/56 H4N6 5. А/крачка/Ю. Африка/61 H5N3 6. А/индюк/Массачусетс/3740/65 H6N2 7. А/вирус чумы птиц/Росток/34 H7N1 8. А/утка/Онтарио/6118/68 H8N4 9. А/индюк/В исконсин( 1 /66) H9N2 10. А/цыпленок/Г ермания/49 H10N7 11. А/Утка/Англия/5 6 H11N6 12. А/утка/ Альберта/ 60/16 H12N5 13. А/черноголовый хохотун/Астрахань/142/7 H13N2

Кроме 13 подтипов Г А, все штаммы ВГП содержат в своей структуре НА или птичьего, или человечьего, или лошадиного происхождения. Собственно птичьей НА известно 6 типов. Подтиповая классификация ВГП продолжается и по сегодняшний день, т.к. новые факты выделения их от птиц различных видов регистрируются ежегодно в различных регионах земного шара. В 1971 г. была опубликована номенклатура вирусов гриппа А, рекомендованная группой экспертов ВОЗ. Согласно этой рекомендации каждый штамм обозначается по месту и времени выделения, а в скобках указывается его АГ формула. Эта номенклатура себя оправдала, однако накопившиеся за последние годы данные требуют ее пересмотра. В 1980 г. ВОЗ предложила новую номенклатуру ВГП. Предложено обозначать серотипы ГА и НА последовательными номерами, независимо от происхождения вирусов. Таблица эталонных штаммов ВГП свидетельствует о том, что изменения нуклеотидной последовательности

и, как следствие, замена аминокислотных остатков сопряжено с изменением патогенности вируса гриппа в отношении птиц и КЭ. Так, например, изолят А/индюк/Висконсин/68 (H5N9) ВГП состоит из 2-х популяций вируса, имеющих разные гены NS и вызывающих разные биологические реакции в КЭ: быструю (эмбриолетальную - /REL/) или медленную (эмбриолетальную - /SEL/) летальность. Секвенирование показало, что гены NS вариантов REL и SEL различаются лишь 2-мя нуклеотидами, что вызывает замену одного аминокислотного остатка в белках NSIH NS2. Замена в NS1 нейтральна, а появление остатка гена в NS2 приводило к сильному гидрофобному сдвигу. Таким образом, 2 природных варианта гена NS влияют на скорость гибели зараженных КЭ, не затрагивая репликацию вируса (14).

Дикие водоплавающие птицы - резервуар различных подтипов Г А (Н) и нейраминидазы (N) вируса гриппа. В этих популяциях заражения часто происходят там, где водоплавающие птицы, свиньи и люди живут близко и за счет генной реассортации могут образовываться новые более патогенные штаммы вируса гриппа (11). Анализ АГ свойств методами ИФА и РТГА свидетельствует о родстве внутренних белков “человеческих” и “птичьих” вирусов гриппа и различиях в структуре поверхностного гликопротеина - ГА. Вирус гриппа А с АГ формулой H2N2 не выделятся от человека с 1968 г, но изолируется от птиц и, в случае реверсии, может стать эпидемическим (2). Выделенный в Японии в 1925-1926 г. ГА вирус чумы птиц шт. Chiba имеет АГ состав Havl Neql и обозначен как вирус гриппа А/курица/ Япония/25 (HavlNeql) (20). Основные направления изучения АГ-вариабельности вируса гриппа А птиц - это характеристика Г А и НА первичной структуры белков клеточных мембран, которые служат мишенью для адсорбции вируса (18).

Антигенная активность. Вирусы гриппа индуцируют в организме больной и переболевшей птицы АТ, обладающие анти-ГА- и КС свойствами. В экспериментальных условиях специфические АТ можно получить на кроликах, крысах и морских свинках как на нативный вирулентный вирус, так и на инактивированный р-пропиолактоном.

Экспериментальная инфекция. Вирусы КЧП (грипп А - H7N1, а также H5N3) патогенны для кур и цыплят при любом методе заражения.

Белые мыши заболевают при заражении в носовую полость и мозг. Некоторые штаммы токсичны при внутривенном введении. Экспериментальное заражение вирусом других подтипов иногда протекает бессимптомно. Экспериментальная инфекция у восприимчивых птиц зависит от вирулентности вируса, степени его адаптации и сопутствующих инфекций (микоплазмоз, колибактериоз, ас- пергиллёз и др.).

Культивирование. Все штаммы ВГП хорошо размножаются в КЭ при заражении в аллантоисную или амниотическую полость. Накопление вируса зависит от вирулентности штамма и степени его адаптации к этой системе. Все штаммы КЧП уже в 1-ом пассаже (при выделении) вызывают гибель эмбрионов через 26-36 ч, по мере адаптации вирулентность их возрастает, достигая 107-108 ЭЛД50/Мл и выше. Вирус гриппа А6 слабовирулентен для эмбрионов, и ГА-титр его возрастает. Одни штаммы ВГП после адаптации размножаются в культуре клеток фибробластов КЭ, почек обезьян и других первично-трипсинизированных культурах клеток. Другие дают в определённых клеточных культурах один цикл размножения, продуцируя инфекционный вирус. Так размножаются вирусы КЧП в L-клетках и некоторые штаммы гриппа птиц в диплоидных культурах клеток человека. Вирус КЧП, адаптированный в культуре клеток WI-38, развивался в миелобластах цыплят, заражённых вирусом миелобластоза, и в первичных культурах клеток лёгких эмбриона человека. Большинство штаммов вируса дают бляшки в первичной культуре клеток фибробластов.

Нейраминидазная активность. Нейраминидазная активность штаммов ВГП не зависит от ГА- и инфекционной активности и не коррелирует с ними (5) .

ГА свойства. Все ВГП агглютинируют эритроциты кур, морских свинок, кроликов, лошадей, овец и других животных. В отличие от вируса НБ штаммы вируса КЧП агглютинируют эритроциты лошади и овцы. Это свойство используют для дифференциации выделенных на эмбрионах штаммов вируса КЧП и НБ.

Эталонные штаммы ВГП (смесь различных сероподтипов) обладают разной ГА- (1:64- 1:1024) и инфекционной активностью (5,28-8,70 ЭИД50/мл) при однотипных условиях накопления (табл. VIII.3.)

Таблица VIII.3. Сравнительная характеристика Г А

и инфекционной активности штаммов Вирусы Титр ГА ЭИДдомл NA актиность на 1 ГАЕ А/цыпленок/Г ермания/49(Н10N7) 1 1024 6,27-7,66 1,64-10,5 А/утка/Англия/56(Н11N6) 1 128-1:512 5,66-7,80 42,0-299,0 А/утка/Чехословакия/ 5 6(H4N 6) 1 64-1:256 5,39-8,70 39,0-157,0 А/крачка/Ю. Африка/61 (H5N3) 1 64-1:256 6,77-8,23 26,0-165,0 А/индюшка/Массачусетс/5 6(H6N2) 1 128-1:512 5,84-8,31 6,0-39,0 А/утка/У краина/63 (НЗ N 6 8) А/индюк/ О 1 126-1:256 5,28-7,66 85,0-390,0 нтарио/6118(H8N4) 1 128-1:512 6,59-8,0 1,2-2,58

МА-активность в условных единицах (у) у разных штаммов варьирует в пределах от 1,2 до 390 у. ГАд свойства проявляются с эритроцитами кур, при культивировании вируса в культуре фибробластов КЭ.

<< | >>
Источник: Сюрин В.Н., Самуйленко А.Я., Соловьёв Б.В., Фомина Н.В.. Вирусные болезни животных. - Москва, ВНИТИБП, 928 с, ил.. 2001

Еще по теме ХАРАКТЕРИСТИКА ВОЗБУДИТЕЛЯ:

  1. ХАРАКТЕРИСТИКА ВОЗБУДИТЕЛЯ
  2. ХАРАКТЕРИСТИКА ВОЗБУДИТЕЛЯ
  3. ХАРАКТЕРИСТИКА ВОЗБУДИТЕЛЯ
  4. ХАРАКТЕРИСТИКА ВОЗБУДИТЕЛЯ.
  5. ХАРАКТЕРИСТИКА ВОЗБУДИТЕЛЯ
  6. ХАРАКТЕРИСТИКА ВОЗБУДИТЕЛЯ
  7. ХАРАКТЕРИСТИКА ВОЗБУДИТЕЛЯ
  8. ХАРАКТЕРИСТИКА ВОЗБУДИТЕЛЯ
  9. ХАРАКТЕРИСТИКА ВОЗБУДИТЕЛЯ
  10. ХАРАКТЕРИСТИКА ВОЗБУДИТЕЛЯ
  11. ХАРАКТЕРИСТИКА ВОЗБУДИТЕЛЯ
  12. ХАРАКТЕРИСТИКА ВОЗБУДИТЕЛЯ
  13. ХАРАКТЕРИСТИКА ВОЗБУДИТЕЛЯ
  14. ХАРАКТЕРИСТИКА ВОЗБУДИТЕЛЯ
  15. ХАРАКТЕРИСТИКА ВОЗБУДИТЕЛЯ
  16. ХАРАКТЕРИСТИКА ВОЗБУДИТЕЛЯ.