<<
>>

ВЫДЕЛЕНИЕ И ФЕНОТИПИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКАНОВЫХ ШТАММОВ БАКТЕРИЙРОДОВ PSEUDOMONAS И AZOTOBACTER -АНТАГОНИСТОВ ФИТОПАТОГЕННЫХ ГРИБОВ

  Источниками выделения бактерий, проявляющих антагонизм в отношении фитопатогенных грибов, послужили образцы различных типов почв, в том числе находящихся в сельскохозяйственном использовании, образцы ризосферы культурных и дикорастущих растений, а также сточные воды биологических очистных сооружений.
Образцы почв отбирали в апреле-октябре 1999-2002 гг.
Всего проанализировано около 320 образцов: почвы Башкортостана (Мелеузовский, Кугарчинский, Уфимский, Салаватский, Нуримановский, Мечетлинский, Туймазинский районы), почвы Оренбургской, Московской областей, Ставропольского края (Прикумская опытная селекционная станция), Краснодарского края (Адлер, Анапа), образцы с опытно-заливных станций с разной степенью увлажнения, почвенные образцы из Турции, США, Израиля, Китая, Ирана; ризосфера растений семейств злаковых, лютиковых, зверобойных, кирказоновых, первоцветных, маковых, пасленовых, маревых, зонтичных, луковых, бобовых, тыквенных; а также сточные воды биологических очистных сооружений Уфы, Стерлитамака, Орска.
Для выделения бактерий р. Pseudomonas применяли метод накопительных культур с использованием синтетической питательной среды Козера [Смирнов, Киприанова, 1990] с добавлением 0,1% пирувата. Пируват был выбран в качестве источника углерода в связи с тем, что, по данным В.В. Смирнова и Е.А. Киприано- вой [1990], пировиноградную кислоту утилизирует 98% штаммов различных видов псевдомонад. pH среды устанавливали перед стерилизацией с помощью 20%-ного раствора NaOH, pH 6,8-7,2.
В качалочные колбы объемом 250 мл со 100 мл стерильной среды Козера вносили исследуемые пробы в количестве 1 г (мл) и инкубировали на качалке (п = 170 об/мин) при 28-30° в течение 5 сут, после чего содержимое колб высевали на чашки Петри с МПА для получения изолированных колоний.
Для выделения штаммов азотобактера из почвы была использована одна из классических методик - метод посева почвенных комочков по Виноградскому [Рубенчик, 1960].
Метод почвенных комочков заключается в высеве мелких комочков почвы на агаризованную среду, не содержащую азот. Для этого на среду Эшби с добавлением следовых количеств молибдена раскладывали мелкие комочки просеянного почвенного образца (15 комочков на 1 чашку Петри), чашки с комочками инкубировали в термостате при температуре 28° в течение 4—6 сут. При наличии в почвенном образце азотобактера на комочках появлялся характерный слизистый налет, преимущественно состоящий из культур азотобактера. С целью получения чистых изоля- тов проводили высев на чашки Петри с агаризованной средой Эшби для получения изолированных колоний.
Полученные изоляты микроорганизмов исследовали на наличие антагонизма в отношении фитопатогенных грибов. На начальном этапе исследований в качестве тест-объекта был выбран несовершенный гриб Bipolaris sorokiniana Shoem (= Drechslera sorokiniana Subram., Helminthosporium sativum P., K. et В.) - один из возбудителей обыкновенной корневой гнили злаковых культур [Пересыпкин, 1989]. Изучение антагонистических свойств изолятов проводили в чашках Петри на среде ГПА, содержащей 0,5% глюкозы; 0,5% пептона; 0,4% К2НР04; 0,2% КН2Р04 и 1,5% агар-агара в дистиллированной воде, а также на среде КГА. Данные среды были выбраны с целью создания оптимальных условий для одновременного роста культур гриба и бактерий.
Суспензию спор тест-гриба высевали на агаризованную среду, а исследуемую культуру вносили, делая посев уколом поверх газона гриба. Чашки инкубировали в термостате в течение 3 сут при температуре 28°. Антагонистов выявляли по наличию вокруг колонии бактерии зоны подавления роста тест-гриба. В дальнейшем данную методику использовали во всех случаях, когда необходимо было определить антагонистическую активность штаммов псевдомонад и азотобактера.
В качестве тест-объектов для определения спектра антагонистического действия штаммов пседомонад и азотобактера служили также следующие мицелиальные грибы: F. culmorum ВКМ 844, F. gibbosum ВКМ 848, F. graminearum ВКМ 1668, F. nivale ВКМ 3106, F. oxysporum ВКМ 137, F. semitectum ВКМ 1938, F. solani ВКМ 142, F. avenaceum ВКМ 132, Alternaria alternata. Penicillium funiculosum.
Микромицеты под номерами 9,10 и Bipolaris sorokiniana - местные изоляты и хранятся в Коллекции микроорганизмов Института биологии УНЦ РАН.
Для каждого штамма делали по 5 повторностей (уколов). Количественная оценка антагонистической активности культур представлена величинами диаметров зон ингибирования роста тест-грибов, мм.
Определение культуральных и физиолого-биохимических характеристик культур псевдомонад проводили по стандартным методикам идентификации бактерий р. Pseudomonas [Практикум..., 1976; Скворцова, 1981; Методы..., 1984; Смирнов, Киприа- нова, 1990; Определитель..., 1997].
Определение культуральных и физиолого-биохимических характеристик штаммов азотобактера проводили по стандартным методикам, описанным в “Определителе бактерий Берджи” [Определитель..., 1997), по идентификационным признакам, указанным Л.И. Рубенчиком, Е.Н. Мишустиным [Рубенчик, 1960; Мишустин, Шильникова, 1968], а также Ф. Герхардтом и др. [Методы..., 1984].
Изучение особенностей углеродного питания псевдомонад проводили на агаризованной среде Козера [Смирнов, Киприано- ва, 1990] либо для культуры азотобактера - на агаризованной среде Федорова с внесением 0,1-1% исследуемого источника углерода. Культуры бактерий высевали на чашки штрихом. Рост микроорганизма или его отсутствие отмечали визуально. Контролем служила среда без источника углерода.
В результате обширного скрининга из различных источников было изолировано около 2300 штаммов микроорганизмов родов Pseudomonas и Azotobacter, из которых антагонистическую активность проявили 17 изолятов, наиболее активные из которых представлены в табл. 1. Как видно из таблицы, источниками
Таблица 1. Источники выделения штаммов-антагонистов

Штамм

Источник выделения

51

Пашня, культура - сахарная свекла Льговская 042, предшественник - пшеница Харьковская 46, Мелеузовский район РБ

6

БОС ОАО "Орскнефтеоргсинтез", аэротенк

56

БОС г. Стерлитамака, отстойник № 2

17

БОС ОАО "Орскнефтеоргсинтез", вход хозбытовых стоков

182

Супесчаная почва, Иглинский район РБ

1

Пашня, Уфимский район РБ

3

Прикорневая зона моркови, Уфимский район РБ

4

Пашня, Мечетлинский район РБ


Вид фитопатогенных грибов

Диаметр зоны ингибирования роста гриба, мм

Р aureofaciens ИБ 51

Р aureofaciens ИБ 6

Р putida ИБ 56

Р putida ИБ 17

F culmorum

9,2±2,3

21,0±3,2

18,7±1,1

14,3±2,4

F gibbosum

35,1 ±2,7

10,3±3,4

12,2±2,3

12,5±3,3

F graminearum

7,4±1,1

-

-

-

F mvale

31,4±2,3

18,8±3,1

10,0±2,1

12,8±2,7

F oxysporum

29,1 ±2,5

10,2±2,8

7,4±1,3
/>11,0±3,9

F semi tectum

9,3±1,7

14,5±3,4

22,3±3,8

26,7±4,9

F solani

9,1 ±2,3

10,1 ±2,7

12,1 ±2,7

12,3±2,5

F avenaceum

16,1 ±2,5

8,2±3,2

8,2±1,4

9,3±2,5

Bipolaris
sorokimana

33,7±3,3

35,0±1,5

30,3±4,7

25,0±2,3

Alter папа alternata

19,2±3,5

15,5±1,2

14,0±3,3

18,0±2,2

Penicillium
fumculosum

31,7±3,2


10,0±2,6

14,5±2,4

Вид фитопатогенных грибов

Диаметр зоны ингибирования роста гриба, мм

Pseudomonas sp ИБ182

Az vinelandu ИБ 1

Az vinelandu ИБ 3

Az vinelandu ИБ 4

F culmorum

18,3±3,2

21,0±2,1

22,0±3,0

20,0±2,5

F gibbosum

8,4±2,1

20,5±1,9

6,0±2,2

18,0±2,2

F graminearum

-

11,3±1,5

8,5±2,4

14,4±1,4

F mvale

10,0±3,3

9,0±1,7

5,5±2,3

9,5±0,5

F oxysporum

10,5±2,2

12,7±2,2

-

10,4±2,1

F semitectum

15,3±1,1

15,0±2,0

19,5±1,6

14,2±1,1

F solani

13,7±2,2

12,5±2,1

12,0±1,3

9,0±0,5

F avenaceum

9,4±1,1

18,0±1,3

12,0±1,7

19,0±2,3

Bipolaris
sorokimana

25,0±3,3

28,0±2,0

19,7±2,5

21,0±2,1

Alternaria
alternata

14,0±2,5

30,0±4,3

12,0±2,1

14,0±2,0

Penicillium
fumculosum

-

11,0±3,3

21,0±1,5

14,0±1,6

Примечание

(-) означает отсутствие подавления роста тест-гриба.


Таблица 3. Морфология колоний штаммов-антагонистов р. Pseudomonas при росте на плотных питательных средах

Диагностическая среда

Штаммы 51,6

Штаммы 56,17, 182

МПА

Колонии круглые с ровными краями,

Колонии круглые с


гладкие, слабовыпуклые, непрозрач-

ровными краями,


ные, ярко-оранжевые в центре с более

гладкие, слабовы


светлой окантовкой, слизистой кон-

пуклые, непрозрач


систенции, диаметром 5-6 мм, пигмент

ные, серовато-белые,


ярко-оранжевый, диффундирующий в

диаметром


среду; также наблюдается образование

5-7 мм, пигмент


желто-зеленого, флуоресцирующего,

желто-зеленый,


диффундирующего в среду пигмента.

флуоресцирующий,


Молодые колонии беловатые, красно

диффундирующий


оранжевый пигмент появляется с увеличением возраста культуры
/>вереду

МПА с 2%

Колонии крупнее, интенсивнее окра


глицерина

шены, чем на МПА, более интенсивная диффузия в среду оранжевого пигмента


Кинг А

Синий пигмент отсутствует


Кинг В

Образуется желто-зеленый, флуоресцирующий пигмент

Таблица 4. Особенности роста штаммов-антагонистов р. Pseudomonas в жидкой культуре и на скошенном агаре

Штамм

Рост в жидкой культуре (МПБ)

Рост на скошенном агаре (МПА)

51

Тонкая, сплошная, складчатая пленка

Штрих обильный,

6

Тонкая, сплошная, складчатая пленка

сплошной с ровным

56

Обильный, хлопьевидный осадок и тонкая, сплошная, рыхлая пленка

краем

17

Обильный, плотный, дискообразный осадок


182

Обильный, плотный, дискообразный осадок


выделения новых штаммов служили как традиционные природные биотопы, обеспечивающие высокое биоразнообразие микробного населения - почва ризосферы, так и антропогенные экосистемы. Очевидно, микробиота биологических очистных сооружений, осуществляющая жизнедеятельность за счет разнообразных субстратов, - перспективный источник штаммов, обладающих необходимыми свойствами.

Штамм

Морфология на среде Эшби

Морфология на КГ А

1

На 24-48 ч роста колонии

На 24-48 ч колонии


слизистые, прозрачные, круглые

круглые, диаметром 6 мм,


диаметром 3 мм, тянутся за

выпуклые, белого полу


петлей. Клетки - длинные тонкие

прозрачного цвета, кон


палочки,- 1,5 х 0,5 мкм, под-

систенция тягучая, мягкая


вижные



На 72 ч колонии морщинистые с

Клетки представляют со


неровными краями, слегка

бой мелкие, подвижные


вросшие в агар
В культуре встречаются палочки, 1,5 х 1 мкм клостридиальной формы, неподвижные, цисты

палочки, 1,5 х 1 мкм

3

На 24-48 ч роста колонии

На 24-48 ч колонии


слизистые прозрачные, круглые,

круглые, диаметром 6 мм,


диаметром 3 мм, тянутся за пет-

выпуклые, белого полу


лей. Клетки представляют собой

прозрачного цвета, консис


толстые палочки 1,5 х 0,7 мкм с

тенция тягучая, мягкая.


закругленными концами, подвиж

Клетки представляют со


ные

бой мелкие подвижные па


На 72 ч колонии круглые, диаметром 5 мм, выпуклые, с ровными краями, слизистые с блестящей поверхностью, прозрачные. В культуре встречаются палочки, 1,5 х 1 мкм, клостридиальной формы, неподвижные, цисты

лочки, 1,5 х 2 мкм

4

На 24—48 ч колонии слизистые,

На 24—48 ч колонии круг


прозрачные, слегка тянущиеся

лые, диаметром 5 мм, плос


за петлей, выпуклые с ровными

кие с неровными краями,


краями, диаметром 1-2 мм. Клет

непрозрачные, цвета слоно


ки - мелкие палочки, 0,6 мкм, с

вой кости, консистенция


закругленными концами, подвиж

маслянистая, мягкая. Мел


ные

кие, 0,7 мкм, малоподвиж


На 72 ч колонии круглые, диаметром 5 мм, выпуклые с ровными краями, слизистые с блестящей поверхностью, прозрачные. Палочки 0,7 мкм, неподвиж

ные палочки с тупыми концами
На 48-72 ч образуют цисты
/>
ные



Для дальнейших исследований были отобраны пять штаммов р. Pseudomonas: 51, 6, 56, 17, 182 и три штамма р. Azotobacter: 1, 3, 4, которые продемонстрировали высокую антагонистическую активность в отношении широкого спектра фитопатогенных грибов (табл. 2, рис. 1, 2; см. цв. вкл.).
Определение культуральных и физиолого-биохимических характеристик культур-антагонистов проводили стандартными методами. Морфологию колоний штаммов-антагонистов р. Pseudomonas на питательных средах определяли после 4—5 сут роста при 28° (табл. 3). Особенности роста штаммов в жидкой культуре (в МПБ) и на скошенном агаре МПА представлены в табл. 4. Морфологию колоний штаммов-антагонистов р. Azotobacter определяли после 2-3 сут роста при 28° на питательных средах КГА и Эшби (табл. 5).
Данные, характеризующие физиолого-биохимические свойства штаммов-антагонистов, представлены в табл. 6-10.
Анализ физиолого-биохимических признаков показал, что выделенные штаммы 51, 6, 56, 17, 182 представляют собой подвижные прямые мелкие клетки палочковидной формы; спор не образуют; грам-отрицательные; аэробы; оксидазная реакция - положительная; в органических факторах роста не нуждаются; каталазоположительные (см. табл. 6) и могут быть отнесены к бактериям р. Pseudomonas.
По ряду признаков, используемых для дифференциации псевдомонад, таких как образование оранжевого пигмента, рост при 4°, наличие аргининдигидролазной активности, синтез левана из сахарозы, гидролиз желатины и лецитина, липолиз Твина-80, неспособность к денитрификации и гидролизу крахмала; утилизация сахарозы, галактозы, DL-триптофана, L-аргинина, фенилаланина, а также неспособность использовать в качестве источника углерода сорбит, адипиновую кислоту, DL-метионин, этанол, штаммы 51 и 6 были отнесены к представителям вида Р. aureofa- ciens. Перечисленные выше признаки характерны для более чем 80% штаммов данного вида [Скворцова, 1981; Смирнов, Киприа- нова, 1990; Определитель..., 1997].
Ряд свойств, таких как образование желто-зеленого, флуоресцирующего, диффундирующего в среду пигмента, рост при 4°, наличие аргининдигидролазы, а также отсутствие желатиназной, амилолитической, лецитиназной, левансахаразной активностей, неспособность к денитрификации; утилизация глюкозы, бутанола, пропионовой кислоты, L-аргинина, DL-лейцина, DL-a-аланина, DL-валина, а также неспособность использовать в качестве источника углерода адипиновую, антраниловую, малеиновую кис-

Признак

Штамм 51

Штамм 6

Штамм 56

Штамм 17

Штамм 182

Морфологичес-

Подвиж-

Подвиж-

Подвиж

Подвиж

Подвиж

кие свойства

ные

ные

ные

ные

ные

клеток

прямые

прямые

прямые

прямые

прямые


мелкие

мелкие

мелкие

мелкие

мелкие


палочки

палочки

палочки

палочки

палочки

Окраска по Граму

Грам (-)

Грам (-)

Г рам (-)

Грам (-)

Г рам (-)

Пастеризация (80 °, 10 мин)

Рост (-)

Рост (-)

Рост (-)

Рост (-)

Рост (-)

Флуоресцирующие диффундирующие пигменты

+

+

+

+

+

Нефлуоресцирующие диффундирующие пигменты

+(оранж.)

+(оранж.)




Рост при 4 °

+

+

+

+

+

Потребность в органических факторах роста






Отношение к

Аэроб

Аэроб

Аэроб

Аэроб

Аэроб

кислороду

ный рост

ный рост

ный рост

ный рост

ный рост

Каталаза

+

+

+

+

+

Оксидаза

+

+

+

+

+

Денитрификация

-

-

-

-

-

Аргининдигид-
ролаза

+

+

+

+

+

Образование Левана из сахарозы

+
/>+



Гидролиз
желатины

+

+




Г идролиз крахмала

-

-

-



Гидролиз
лецитина

+

+



+

Липолиз
Твина-80

+

+

-



Рост в присутствии 3% NaCl

+

+

+

+

+

Примечание. (+) - наличие признака; (-) - lt;

отсутствие признака.



Таблица 7. Характеристика использования питательных субстратов штаммами-антагонистами р. Pseudomonas

Источник углерода

Штамм 51

Штамм 6

Штамм 56

Штамм 17

Штамм 182

Глюкоза

+*

+*

+*

+*

+*

Ксилоза

+*

+*

+*

+*

+*

Арабиноза

+*

-

+*

+*

-

Сахароза

+*

+*

+

+

+

Мальтоза

+

+

+

+

-

Раффиноза

+*

+*

+

+*

+

Фруктоза

+*

+*

+*

+

+

Лактоза

-

+

+*

+*

+

Рамноза

+

-

+

+*

+

Г алактоза

+*

+*

+*

+*

+*

Глицерин

+

+

+

+

+

Этанол

-

-

+

+

+

Пропанол

-

+

-

+

+

Бутанол

+

+

+

+

+

Гексанол

+

+

+

+

+

Маннит

+

+

-

-

-

Сорбит

-

-

-

-

-

L-инозит

-

-

-

-

-

Пропионовая

+

+

+

+

-

кислота





/>Малеиновая
-

-

-

-

+

кислота






Адипиновая

-

-

-

-

-

кислота






Антраниловая

+

-

-

-

-

кислота






Янтарная

+

+

+

+

+

кислота






а-кетоглутаро-

+

+

+

+

+

вая кислота






Изомасляная

-

+

-

+

-

кислота






Ацетат

+

+

+

+

-

Пируват

+

+

+

+

-

Лактат

+

+

+

+

-


Источник углерода

Штамм 51

Штамм 6

Штамм 56

Штамм 17

Штамм 182

Цитрат

+

+

+

+

+

Оксалат

-

-

-

-

-

DL-треонин

-

-

+

-

-

DL-серин

+

+

+

-

+

DL-метионин

-

-

-

-

-

DL-цистеин

-

-

-

-

-

DL-лейцин

+

+

+

+

+

L-аргинин

+

+

+

+

+

DL-a-аланин

+

+

+

+

+

DL-валин

+

+

+

+

+

DL-триптофан

+

+

-

-

-

L-пролин

+

+

+

+

+

DL-лизин

+

+

+

+

+

L-тирозин

+
/>+
+

+

+

D-аспарагин

-

-

-

-

-

L-аспарагин

+

+

+

+

+

Фенилаланин

+

-

+

+

+

Тетрадекан

-

-

-

-

-

Октадекан

-

-

-

-

-

Ацетамид

-

-

-

-

-

Формальдегид

-

-

-

-

+

Фенол

-

-

-

-

-

* Утилизация сахаров с образованием кислоты; (+) - субстрат используется в качестве источника углерода, (-) - субстрат не используется в качестве источника углерода.

лоты, сорбит, ацетамид, позволили отнести изоляты 56 и 17 к представителям вида Р. putida. Упомянутые выше признаки характерны для более чем 80% штаммов данного вида [Скворцова, 1981; Смирнов, Киприанова, 1990; Определитель..., 1997].
Гетерогенность штаммов Р. putida в отношении источников углеродного питания нашла отражение в том, что в пределах вида выделены биовары А и В. Изучение использования выделенными штаммами 56 и 17 ряда источников углерода и сопоставление полученных результатов с данными литературы [Смирнов, Киприанова, 1990] позволило сделать предварительные выводы

Таблица 8. Потребление некоторых источников углерода штаммами 56 и 17 в сравнении с биоварами А и В Р. putida

Источник
углерода

Биовар А

Биовар В

Штамм 56

Штамм 17

Сорбит

-

+

-

-

Маннит

в

в

-

-

Галактоза

в

в

+

+

Фенол

-

в

-

-

Антранило- вая кислота

-

-

-

-

Триптофан

+

-

-

-

Метионин

-

+

-

-

Цистеин

-

+

-

-

Примечание, в - признак варьирует; (+) - i

субстрат используется в качестве

источника углерода; (-) - субстрат не используется в качестве источника углерода.

о том, что фенотипически штаммы 56 и 17 ближе к биовару А (табл. 8).
Таким образом, по совокупности признаков новые штаммы 51 и 6 были идентифицированы как Р. aureofaciens и депонированы в Коллекцию микроорганизмов Института биологии УНЦ РАН под № ИБ 51 и № ИБ 6; штаммы 56 и 17 были идентифицированы как Р. putida и депонированы в Коллекцию микроорганизмов Института биологии УНЦ РАН под № ИБ 56 и № ИБ 17.
У культуры 182 по совокупности морфологических, культуральных и биохимических признаков не удалось однозначно установить видовую принадлежность. Этот изолят по своим свойствам схож с Р. putida, но в отличие от представителей этого вида гидролизует лецитин. Вследствие сказанного выше штамм был депонирован в Коллекцию микроорганизмов Института биологии УНЦ РАН как Pseudomonas sp. ИБ 182.
В соответствии с культуральными свойствами штаммы 1, 3,4 были отнесены к р. Azotobacter. Среди важнейших диагностических характеристик, использованных в процессе идентификации данных изолятов, следует перечислить следующие свойства: грам-отрицательные, на твердых питательных средах, не содержащих азотных соединений, штаммы 1, 3, 4 образуют крупные слизистые, иногда морщинистые колонии [Рубенчик, I960]; отличаются крайне широким спектром потребления источников углерода [Мишустин, Шильникова, 1968], растут на среде с 0,15% бензойнокислого натрия. Не растут (штаммы 1,3) или проявляют слабый рост (штамм 4) на белковых средах, спор не образуют, но имеет место цистообразование, аэробы, фиксируют молекулярный

Физиолого-биохимическая
характеристика

Штамм 1
/>Штамм 3
Штамм 4

Окраска по Г раму

-

-

-

Спорообразование (80°, 15мин)

-

-

-

Образование цист (50°, 15 мин)

+

+

+

Рост в анаэробных условиях

-

-

-

Способность к нитрификации

-

-

-

Способность к денитрификации

-

-

+

Окислительно-восстановительные ферменты


Оксидаза

-

-

-

Каталаза

+

+

+

Дегидрогеназа

-

-

-

Протеолитические ферменты


Гидролиз желатины

-

-

-

Гидролиз казеина

+

+

+

Рост на МПА

-

-

+

Липолитические ферменты


Липолиз Твина-80

+

+

+

Гидролиз лецитина

+

+

-

Примечание. (+)- наличие признака; (-) - отсутствие признака.


азот, в молодой культуре все штаммы подвижны, имеют форму палочек с закругленными концами [Рубенчик, 1960] (табл. 9, 10).
Согласно “Определителю бактерий Берджи” из всех видов азотобактера только бактерии, относящиеся к Az. vinelandii, используют рамнозу в качестве источника углерода; кроме того, представители этого вида на среде, дефицитной по железу, образуют флуоресцирующий пигмент. Оба эти свойства были отмечены у всех трех выделенных изолятов, предварительно отнесенных к р. Azotobacter (см. табл. 9, 10).
Еще одной из отличительных черт, характерных для бактерий вида Az. vinelandii, является выделение экзополисахаридов на богатых питательных средах [Пат. РФ 2073712; Horan et al., 1981; Anderson et al., 1987; Brivonese, Sutherland, 1989; Beale, Foster, 1996; Parente et al., 1998; Vargas-Garcia et al., 2003; и др.]. Штаммы 1 и 3 проявили эту способность при росте в жидкой культуре на

Таблица 10. Способность штаммов азотобактера к росту на различных источниках углеродного питания

Используемый источник углерода

Штамм 1

Штамм 3

Штамм 4

Глюкоза

+

+

+

Сахароза

+

+

+

Маннит

+

+

+

Фруктоза

+

+

+

Сорбит

+

+

-

Глицерин

+

+

+

Мальтоза

+

+

+

Декстрин

+

+

+

Арабиноза

+

+

-

Ксилоза

+

+

+

Маноза

+

+

+

Г алактоза

+

+

+

Лактоза

+

+

+

Рамноза

+

+

+

Мезо-инозитол

+

+

+

Капронат

+

+

+
/>Капилат
+

+

+

Манитол

+

+

+

Малонат

+

+

+

Натрий бензойнокислый

+

+

+

Натрий уксуснокислый

+

+

+

Калий виннокислый

+

+

+

L-инозит

+

+

+

Цистеин

+

-

+

Этанол

+

+

+

Леван

+

+

+

Твин

+

+

+

Крахмал

+

+

+

Пировиноградная кислота

-

-

-

Янтарная кислота

-

-

-

а-кетоглуторат

+

+

+

Изомасляная кислота

-

+

+

Малеиновая кислота

-

-

+

Сульфаниловая кислота

+

+

+

Пропионовая кислота

-

-

+

Щавелевая кислота

-

-

-

Цитрат

-

-

+

а-аминобензойная кислота

-

-

+

Муравьиная кислота

-

-

-

Примечание. (+) - субстрат используется в качестве источника углерода; (-) - субстрат не используется в качестве источника углерода.



картофельно-глюкозной среде и на среде Федорова с мелассой в качестве источника углерода, штамм 4 на этих средах также продуцировал экзополисахарид, но в меньшей степени.
Таким образом, по совокупности признаков новые штаммы 1, 3, 4 были идентифицированы как Az. vinelandii и депонированы в Коллекцию микроорганизмов Института биологии УНЦ РАН под № ИБ 1, № ИБ 3, № ИБ 4.
Таким образом, были выделены и идентифицированы до вида пять новых штаммов бактерий-антагонистов р. Pseudomonas: Р. aureofaciens ИБ 51, Р. aureofaciens ИБ 6, Р. putida ИБ 56, Р. puti- da ИБ 17, Pseudomonas sp. ИБ 182 и три новых штамма р. Azotobacter: Az. vinelandii ИБ 1, Az. vinelandii ИБ 3, Az. vinelandii ИБ 4.
<< | >>
Источник: о.н. логинов. БАКТЕРИИ Pseudomonasи Azotobacter как объектысельскохозяйственнойбиотехнологии. 2005

Еще по теме ВЫДЕЛЕНИЕ И ФЕНОТИПИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКАНОВЫХ ШТАММОВ БАКТЕРИЙРОДОВ PSEUDOMONAS И AZOTOBACTER -АНТАГОНИСТОВ ФИТОПАТОГЕННЫХ ГРИБОВ:

  1. БАКТЕРИИ РОДОВ PSEUDOMONAS И AZOTOBACTER -АНТАГОНИСТЫ ФИТОПАТОГЕННЫХ ГРИБОВИ БАКТЕРИЙ
  2. ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИПРИМЕНЕНИЯ НОВЫХ ШТАММОВ БАКТЕРИЙРОДОВ PSEUDOMONAS И AZOTOBACTERДЛЯ ЗАЩИТЫ РАСТЕНИЙ ОТ БОЛЕЗНЕЙИ ПОВЫШЕНИЯ УРОЖАЙНОСТИСЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ КУЛЬТУР
  3. Особенности антагонистического действия  штаммов псевдомонад и азотобактерана фитопатогенные грибы
  4. КОЛОНИЗАЦИЯ РИЗОСФЕРЫ РАСТЕНИЙБАКТЕРИЯМИ-АНТАГОНИСТАМИ РОДОВPSEUDOMONAS И AZOTOBACTER
  5. Изучение влияния интродукцииштаммов-антагонистов родов Pseudomonas и Azotobacterна микробиоту ризосферы пшеницы
  6. Структура и свойства новых метаболитов Pseudomonas и Azotobacter,обладающих фунгицидной активностью
  7. ВЫДЕЛЕНИЕ, ОЧИСТКАИ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТАБОЛИТОВ,ОБЛАДАЮЩИХ ФУНГИЦИДНОЙ АКТИВНОСТЬЮ,ПРОДУЦИРУЕМЫХ БАКТЕРИЯМИ РОДОВ PSEUDOMONASИ AZOTOBACTER
  8. 2.4. Фенотипическая изменчивость и норма реакции
  9. Использование штаммов псевдомонад и азотобактерав качестве агентов биологического контролязаболеваний овощных культур
  10. БАКТЕРИИ РОДОВ PSEUDOMONAS И AZOTOBACTERКАК ПРЕДСТАВИТЕЛИ ГРУППЫ PGPR
  11. ФИТОПАТОГЕННЫЕ МИКРООРГАНИЗМЫ
  12. Исследование способности к разложению фосфатову штаммов псевдомонад и азотобактера
  13. Изучение эффективности применения штаммов псевдомонад и азотобактерадля защиты пшеницы от корневых гнилей и альтернариозав условиях вегетационных,полевых и производственных испытаний
  14. Характеристика выделенных культур по наличию свойств,положительно влияющих на растение
  15. Нитрогеназная активность штаммов псевдомонади азотобактера
  16. РАЗРАБОТКА ТЕХНОЛОГИИОПЫТНО-ПРОМЫШЛЕННОГОПРОИЗВОДСТВАБИОПРЕПАРАТОВ НА ОСНОВЕ БАКТЕРИЙ-АНТАГОНИСТОВ
  17. Влияние условий культивированияна биосинтез низкомолекулярных метаболитовштаммами бактерий Pseudomonas